Cuando se usa para cocinar, las diferencias en el sabor entre el aceite de trufa blanco y negro son extremadamente sutiles. Por lo tanto, el aceite de trufa blanco y negro se puede usar indistintamente. El intenso sabor y aroma del aceite de trufa se crea mediante el uso de compuestos químicos que imitan a los que se encuentran en trufas reales. El aceite de trufa a menudo se produce combinando un gas aromático conocido como 2,4-ditiapentano con aceite de oliva o aceite de girasol.
Hay algunas diferencias de sabor entre las trufas blancas y negras reales que se extraen del suelo. Las trufas negras tienen un sabor terroso y un aroma acre, mientras que las trufas blancas tienen un aroma a almizcle con un sabor que tiene notas de ajo y chalotes. Debido a que las trufas frescas son caras y escasas, el aceite de trufa se usa como sustituto en muchos platos. Los productos químicos artificiales, como el 2,4-ditiapentano, replican los gases naturales producidos por las trufas reales. A algunas personas no les gusta la naturaleza artificial del aceite de trufa comercial, y notan que las trufas naturales producen hasta 30 gases diferentes, una complejidad de aromas que es difícil de duplicar sintéticamente.
El aceite de trufa normalmente se aplica a los alimentos antes de servir. Unas pocas gotas es todo lo que se necesita para realzar el sabor de los platos. Si bien algunos aceites de trufa contienen trocitos de trufas secas, estos no suelen contribuir al sabor del aceite.