Cuando el ADN se desnaturaliza, los enlaces de hidrógeno que mantienen unida la doble hélice se separan, separando la molécula de ADN en dos cadenas simples. La desnaturalización ocurre a medida que aumenta la temperatura, según Ian VanLare, profesor de Biología en Tusculum College.
La temperatura de fusión del ADN depende de tres factores. Uno es el número de pares de guanina y citosina en la muestra. Esto se debe a que los pares G-C comparten tres enlaces de hidrógeno, mientras que los pares de adenina y timina comparten solo dos enlaces de hidrógeno. El segundo factor es la concentración de sodio. El aumento de la concentración de sodio aumenta la estabilidad de la doble hélice de ADN, mientras que la concentración de sodio disminuida hace que la doble hélice sea menos estable. Finalmente, la longitud de un híbrido de ADN también afecta la temperatura de fusión. Esto se debe a que los híbridos más largos tienen más enlaces de hidrógeno para romperse durante la desnaturalización.
Es posible replicar una cadena de ADN después de que se haya desnaturalizado. Los científicos hacen esto agregando un fragmento corto de ADN en un extremo de la hebra única. Esta pieza de ADN se llama cebador. Luego el científico agrega una enzima llamada ADN polimerasa. Esta enzima reconoce las bases en la cadena única de ADN y agrega bases complementarias a la nueva cadena de ADN.