Los elementos cubiertos en una clave dicotómica incluyen si las bacterias son Gram positivas o negativas, catalasa positiva o negativa, tienen enzimas nitrato y contienen la enzima coagulasa. La clave es un conjunto de preguntas que, cuando están completas, ayudan a identificar las bacterias. Cada pregunta requiere completar una cierta prueba.
La prueba Gram-positiva o Gram-negativa determina si hay bacterias presentes en la muestra. El material se tiñe y se pone bajo un microscopio para su estudio. Una tinción de Gram negativa por lo general aparece como rosa e indica que no se ha encontrado ningún organismo. Las manchas de Gram positivas suelen ser de color púrpura y suelen tener más estructuras en la diapositiva.
La prueba de catalasa se usa para identificar estafilococos, una lectura positiva o estreptococos, una lectura negativa. Las bacterias catalasa positivas ingieren oxígeno, mientras que las bacterias catalasa negativas son generalmente anaeróbicas.
La prueba de nitrato reductasa determina si una bacteria produce una de dos enzimas, la nitrato reductasa o la nitrito reductasa. El material se cultiva en un medio de cultivo que contiene nitrato de potasio. Si el medio de cultivo se vuelve rojo y aparecen burbujas en un tubo Durham conectado, hay nitrógeno presente.
La prueba de coagulasa determina si las bacterias contienen coagulasa, una enzima de coagulación sanguínea. La prueba se realiza utilizando suero sanguíneo transparente. Si la enzima está presente, el suero se nubla y se espesa.