Un microscopio de luz puede usar múltiples tipos de luz para producir múltiples tipos de imágenes, pero todas funcionan sobre la base de la luz enfocada desde abajo de la muestra hacia un condensador, que enfoca la luz, o lente a ser vista. La lente objetivo es lo que causa el aumento real de la muestra en la diapositiva que se hace visible por la luz. Luego se pasa al ocular en la parte superior del microscopio.
La mayoría de los microscopios de luz que se usan en las escuelas o en los hogares de los estudiantes tienen iluminación de campo brillante. Esto significa que la imagen del objeto que se está viendo se ve de una manera muy básica. Los objetos en las diapositivas generalmente se tiñen con un tinte para que el color pueda absorber la luz que está pasando a través de él y ser visto. La cantidad de aumento en los microscopios de luz no es tan alta como otros microscopios, como los microscopios de electrones. Los microscopios de luz están, en promedio, limitados a un aumento de 2,000 veces cuando un microscopio electrónico de transmisión puede magnificar un objeto aproximadamente un millón de veces. Los microscopios electrónicos de barrido pueden magnificar un objeto alrededor de 300,000 veces, haciendo que la ampliación del microscopio de luz parezca mínima. En comparación con el ojo humano, las habilidades del microscopio de luz son mucho más allá de lo que los humanos podrían hacer sin el dispositivo.