La enzima ADN helicasa descomprime la doble hélice de ADN para permitir que se replique. La ADN helicasa tiene una velocidad de rotación de 10.000 rotaciones por minuto y avanza hacia la horquilla de replicación. Desenrolla continuamente las cadenas de ADN para permitir que la ADN polimerasa se una a las nuevas cadenas de nucleótidos.
La helicasa de ADN es una estructura de anillo hexamérico de seis subunidades. Descomprime la doble hélice al descomponer los enlaces de hidrógeno que mantienen unidas las cadenas de ADN. Después de descomprimirse, la cadena con el grupo 3 '-OH se convierte en la cadena principal, que se puede replicar de inmediato. La cadena con el grupo 5 '-OH es la cadena retrasada, y se replica más adelante en un proceso conocido como replicación discontinua.
