El paso de decoloración es el más crítico en la tinción de Gram. El resultado de este paso se basa en la facilidad con que la célula libera el complejo de cristal violeta y yodo.
Descubierta por el Dr. Hans Christian Gram en 1884, la tinción de Gram es una tinción diferencial que se usa para identificar bacterias. Dividir las células bacterianas en dos grupos principales (Gram positivo y Gram negativo), es una herramienta crítica al clasificar y diferenciar las bacterias. Las dos manchas requeridas son la primaria y la contratinción. El exceso de decoloración hace que la mancha primaria desaparezca, y Gram positivo aparece Gram negativo. Por otro lado, la decoloración insuficiente no elimina el complejo de cristal violento y yodo, lo que hace que las bacterias Gram negativas aparezcan positivas.
