La diferencia entre ELISA directo e indirecto es que el ELISA indirecto requiere la adición de un anticuerpo secundario, mientras que el ELISA directo solo usa un anticuerpo primario. El ELISA indirecto se considera más sensible al detectar sustancias, pero el ELISA directo es un proceso más rápido y económico que requiere menos pasos.
El ELISA directo, o el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas, comienza con la absorción de un antígeno en una placa. Luego se agrega una proteína para bloquear todos los demás sitios de unión posibles. Se agrega el primer anticuerpo y se une a cualquier epítopo de antígeno reconocido. El ELISA indirecto continúa el proceso agregando un segundo anticuerpo, que se une al primer anticuerpo. El primer anticuerpo está disponible solo si está unido al antígeno.
Ambos procesos requieren numerosos lavados de laboratorio para eliminar sustancias adicionales. El proceso de ELISA es importante en el laboratorio porque permite a los científicos identificar antígenos. Es una forma popular y confiable para detectar enfermedades y alérgenos alimentarios.
El ELISA indirecto es capaz de detectar cantidades más pequeñas de un antígeno, y permite que se use un único anticuerpo secundario con una gran cantidad de anticuerpos primarios diferentes. El ELISA directo requiere mayores cantidades de antígeno para hacer una detección, y no es tan flexible, porque solo se usa un anticuerpo.
