Las muestras de cultivo que tienen más de 24 horas de edad pueden mancharse incorrectamente, perdiendo su capacidad de aferrarse a la tinción de cristal violeta. Pueden aparecer como organismos gramnegativos cuando en realidad son grampositivos, o la muestra puede mostrar un resultado de variable gramatical.
Las tinciones deGram revelan las diferencias estructurales en las paredes celulares de los organismos en el laboratorio. Los organismos grampositivos tienen una pared celular gruesa que contiene hasta un 90 por ciento de peptidoglicano y aparecen de color azul o púrpura bajo el microscopio después de teñirlos con cristal violeta. Los organismos gramnegativos tienen una pared celular mucho más delgada que contiene hasta un 10 por ciento de peptidoglicano y un alto contenido de lípidos. Estos organismos aparecen rojos o rosados bajo el microscopio después de teñirlos con cristal violeta.
La tinción de Gram es una prueba crítica de laboratorio que forma parte integral del estudio y tratamiento de enfermedades infecciosas. Muchos antibióticos funcionan en organismos gramnegativos o grampositivos debido a la forma en que rompen las paredes celulares. Los antibióticos de amplio espectro funcionan tanto con organismos gramnegativos como grampositivos.
La tinción de Gram fue creada por Hans Christian Gram en 1884. Estaba buscando una forma de visualizar cocos en muestras de tejido pulmonar de quienes habían muerto de neumonía. Él usó el cristal violeta como su mancha principal, seguido por el yodo como fijador y el etanol como decolorante. El paso de decoloración crea la pérdida de la coloración azul-púrpura que diferencia a los organismos grampositivos y negativos entre sí.
