Las mofetas son cazadas por muchas especies diferentes, incluyendo pumas, civetas, coyotes, zorros, linces, tejones americanos y varias aves rapaces. Las mofetas se defienden contra la depredación a través de la coloración de advertencia y la capacidad de rociar. un líquido pegajoso que huele mal de sus glándulas anales, que es muy irritante para los ojos. Sin embargo, las aves de presa se sienten menos intimidadas por las defensas de un zorrillo porque su sentido del olfato suele ser mucho más débil que el de los depredadores de mamíferos.
Las mofetas son cortas en altura y no son particularmente rápidas. Por lo tanto, su capacidad para rociar su almizcle es una de sus principales defensas. Sin embargo, algunas especies de zorrillos pueden escalar para escapar de la depredación. Por lo general, dan una pantalla de advertencia antes de pulverizar levantando sus colas o haciendo una parada de manos. Si la amenaza continúa, inclinan sus cuartos traseros hacia adelante y rocían, tratando de apuntar a los ojos del atacante.
Las mofetas son en sí mismas depredadoras, aunque consumen algunas plantas. Sus presas animales más comunes incluyen insectos, gusanos, roedores, lagartos, serpientes, aves y huevos. Las mofetas son más activas durante la noche. Son madrigueras naturales y cavan en busca de presas y también crean madrigueras para ellos mismos. En climas más fríos, las mofetas acumulan reservas de grasa durante el verano, para que puedan permanecer en sus casas y dormir durante la mayor parte del invierno. Sin embargo, esto no es una verdadera hibernación, ya que usualmente se activan nuevamente durante los períodos cálidos.
