Los azúcares no producen resultados positivos en una prueba de fermentación. La fermentación es el proceso mediante el cual los azúcares se convierten en un producto químico diferente. En una prueba de fermentación, se utilizan azúcares específicos para determinar la presencia de bacterias. Un resultado positivo sería la formación de ácido, gas o alcohol.
Los azúcares utilizados en una prueba de fermentación se seleccionan específicamente en función de los productos en los que se convierten y las bacterias que conducen a ese resultado. Por ejemplo, el agar de sal de manitol mata la mayoría de las bacterias, excepto las bacterias estafilococos resistentes a la sal. Solo ciertas cepas de Staphylococcus reaccionan con el manitol en el agar, como el Staphylococcus aureus, que produce subproductos ácidos. El agar de sal de manitol tiene un indicador de pH rojo que se vuelve amarillo en presencia de niveles de acidez más altos para indicar esta reacción.
Las pruebas de fermentación se llevan a cabo en diferentes medios, según el resultado deseado y las bacterias analizadas. Los dos medios más comunes son los caldos y el agar. El agar es un compuesto gelatinoso producido a partir de algas marinas que permite que la mayoría de las bacterias crezcan en su superficie y puede ser infundido con varios nutrientes y sustancias químicas. Un caldo está compuesto por soluciones de productos químicos. Los medios que restringen ciertos tipos de crecimiento se conocen como selectivos. Los medios que muestran un cambio físico y se utilizan para probar ciertos productos se denominan diferenciales. Estos medios diferenciales son la base de muchas pruebas de confirmación, incluidas las pruebas de fermentación.