El calor es necesario al teñir las esporas porque la aplicación de calor interrumpe las células vegetativas y causa que la malaquita verde se enjuague de ellas, lo que permite que el contratinche entre en las células. Este es un paso necesario en ciertos esporas que son resistentes a los métodos tradicionales de tinción de esporas.
Según el Austin Community College, la tinción es una técnica utilizada por los científicos para identificar las esporas en una muestra de bacterias. Uno de los pasos más importantes en la tinción de esporas es anticipar las propiedades de las esporas que se están analizando, ya que algunas de ellas son resistentes a los procesos de muerte tradicionales. A menudo, esto es el resultado de su resistente capa exterior de proteína, conocida como queratina. Para las endosporas de esta naturaleza, es necesario utilizar una técnica de tinción con calor para teñir las esporas con su tinción primaria, verde de malaquita.
La aplicación de calor debilita la pared de una celda y permite que sea enjuagada y permeada por los tintes. La célula original que forma una endospora se llama célula vegetativa. Estas células son más susceptibles al calor que las endosporas, y pueden enjuagarse y teñirse con verde de malaquita. Basándose en la inflamación y las reacciones de las endosporas, este proceso de teñido se puede usar para identificar esporas que tienen capas resistentes y protectoras.
