En las células eucariotas, la glucólisis tiene lugar en el citosol. Después de la glucólisis, los productos se pueden descomponer en la mitocondria.
La glucólisis describe una serie de reacciones químicas que una célula experimenta para producir energía rápidamente. Una serie de reacciones en una célula se denomina vía metabólica. La glucólisis comienza con moléculas de glucosa almacenadas en forma de glucógeno que se libera y se transforma en un compuesto llamado glucosa 6-fosfato. Se necesitan dos moléculas de trifosfato de adenosina, que es la fuente de energía de una célula, para este primer paso. En total, la glucólisis produce un total de 4 ATP por molécula de glucosa, lo que significa que hay una ganancia neta de 2 ATP por molécula de glucosa de esta vía.