El asentamiento de Jamestown en la actual Virginia fue el primer asentamiento en virtud de los estatutos otorgados a la Compañía de Virginia por King James I. Los colonos de la Compañía de Virginia hicieron tierras en Jamestown Island el 14 de mayo de 1607. El asentamiento creció y finalmente se llevó a cabo la primera asamblea representativa inglesa en América del Norte.
El capitán Bartolomé Gosnold dirigió a los colonos a construir una colonia en la isla de Jamestown porque estaba en una posición en la que los barcos españoles no podrían atacar fácilmente; Sin embargo, los indios atacaron el asentamiento a los pocos días del desembarco. Después de sobrevivir al ataque, la gente comenzó a construir un fuerte rudimentario.
En 1609, el fuerte sufrió una explosión de pólvora que hirió al capitán John Smith, el hombre encargado de ayudar a suministrar al asentamiento bienes procedentes de Inglaterra. El asentamiento apenas logró pasar el siguiente invierno debido a la falta de suministros, las incursiones de los indios y el duro clima; solo 60 colonos sobrevivieron hasta la primavera de 1610. En junio, un barco de Inglaterra finalmente llegó, trayendo consigo nuevos suministros y un nuevo gobernador, Lord De La Warr.
Además, la colonia era conocida por estar asociada con los nativos americanos Pocahontas y su padre, el Jefe Powhatan. Se casó con el tabacalero John Rolfe en 1614.
