Cuando se preparan bacterias para la observación con un microscopio, la fijación por calor del frotis en el portaobjetos mata a las bacterias para detener la posible propagación de la enfermedad y adhiere el frotis a la diapositiva. Después de la fijación por calor, el frote está manchado.
Según el departamento de microbiología de la Universidad de Wisconsin-Madison, la preparación del frotis comienza con una muestra de bacterias mezclada con un poco de agua destilada. La muestra se esparce ligeramente sobre el portaobjetos y se deja secar al aire. A continuación, la diapositiva se fija con calor al pasar la parte inferior a través de la llama de un mechero Bunsen varias veces. Después de una correcta fijación del calor, el tobogán se siente caliente pero no demasiado caliente. Cuando la diapositiva se ha enfriado, se aplica la mancha.
