Aunque los murciélagos vivos no están completamente ciegos, la mayoría de los murciélagos confían en los sonidos para encontrar a sus presas en la noche. Conocidos como ecolocalización, los murciélagos emiten sonidos ultrasónicos que rebotan en otros objetos. Al escuchar estos ecos de los objetos a su alrededor, los murciélagos pueden crear un mapa interno que les permita navegar y capturar alimentos.
La mayoría de los murciélagos consumen insectos o pequeños vertebrados que se adaptan bien a la ecolocación. Algunos murciélagos capturan numerosos insectos pequeños mientras vuelan, mientras que otros cazan insectos grandes que se esconden entre las rocas y la vegetación. Algunos murciélagos, principalmente nativos de África y Asia, subsisten con frutas o polen en lugar de insectos. Los murciélagos que comen frutas y néctar usualmente usan sus sentidos de la vista y el olfato para encontrar a sus presas, y pueden estar activos antes de que caiga la oscuridad.
Los murciélagos que dependen de la ecolocación a menudo tienen solapas y pliegues de piel adheridos a sus caras. Si bien los científicos aún no comprenden completamente su función, es probable que estos colgajos y pliegues ayuden a detectar los sonidos devueltos por la ecolocación. Los murciélagos producen su ecolocación a través de la nariz o la boca. Además de los sonidos ultrasónicos involucrados en la ecolocación, los murciélagos también emiten una gran variedad de sonidos que están dentro del rango de la audición humana.