La solución o reactivo de Benedict funciona oxidando los azúcares para formar ácido carboxílico y un óxido de cobre teñido de rojo. Esto solo funciona debido a la mezcla de reactivos de sulfato de cobre, citrato de sodio y carbonato de sodio. . Las sustancias se hierven en agua.
La prueba solo reacciona con azúcares reductores como la fructosa y la glucosa, pero no puede reaccionar con la sacarosa que se encuentra en el azúcar de mesa. Se utiliza en la industria alimentaria para realizar pruebas de azúcares y para detectar glucosa en la orina que se sospecha que padece diabetes. La solución es azul al principio, lo que indica que no hay azúcares. Una vez que reacciona con un azúcar reductor, el color cambiará a verde, amarillo, naranja, rojo o marrón, con un color marrón que indica un alto nivel de azúcares.